ELISA试剂盒和CLIA试剂盒原理与特点

导读：ELISA试剂盒和CLIA试剂盒原理与特点。ELISA(酶联免疫吸附试验)主要原理为，首先将一抗体包被到某固相载体表面，再将另一抗体与某酶联接成酶标抗体。

参考《2017-2022年中国诊断试剂盒行业运营现状调查及十三五竞争战略分析报告》

        ①ELISA 试剂盒和 CLIA 试剂盒原理

        ELISA(酶联免疫吸附试验)主要原理为，首先将一抗体包被到某固相载体表面，再将另一抗体与某酶联接成酶标抗体。在测定时，把受检标本和酶标抗体按不同的步骤与包被抗体结合形成复合物。洗涤除去复合物以外的物质，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。

        CLIA(化学发光免疫分析)包括化学发光分析系统和免疫反应系统。免疫反应系统原理与酶联免疫吸附试验原理基本相同，只是连接的标记物为发光物质而不是酶，不需要显色，由化学发光分析系统完成。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化，形成一个激发态的中间体，当这种激发态中间体回到稳定的基态时，同时发射出光子，利用发光信号测量仪器光量子产率。化学发光免疫分析技术灵敏度高、特异性强、试剂价格低、方法稳定快速、检测范围宽、操作简单更易于自动化。

        ②ELISA 方法和 CLIA 方法的特点

        ELISA 方法和 CLIA 方法操作简便、灵敏度高，但对抗体品质要求更高，扩大了免疫学检测方法在科研及临床诊断运用。

        第一，ELISA 和 CLIA 方法操作简便。传统的免疫组化、免疫印迹等方法的操作复杂，部分蛋白样品需要变性处理，把有空间结构和有活性的蛋白变成线性和失去或部分失去活性的蛋白，再通过抗体去结合。ELISA 或 CLIA 方法下，利用微孔板清洗机和微孔板读数仪或化学发光分析仪，即使无相关专业背景，实验员只需要按照既定的步骤操作就能获得合格的实验结果。全自动酶免检测系统和全自动化学发光免疫分析系统的推出，进一步简化实验全过程。

        第二，ELISA 和 CLIA 方法灵敏度高。免疫组化或免疫印迹通常只需一种特异性抗体即可完成实验，而 ELISA 或 CLIA 则需要二种特异性强且能识别有活性蛋白的抗体或局部片段抗体才能包被完成，因此，它的特异性及灵敏性优于免疫组化和免疫印迹。

        第三，ELISA 和 CLIA 方法技术要求更高。抗体主要性能指标包括特异性、亲和力等。普通亲和力与普通特异性的抗体已经能满足免疫组化、免疫印迹或免疫荧光的要求。作为 ELISA 或 CLIA 的制备需要高亲和力和高特异性的抗体，需要更高的技术。

        第四，免疫学检测方法使用越来越广泛。检测试剂盒是利用 ELISA 或 CLIA原理所集成的一种便于使用的成套试剂。只需要采集身体少量体液就可以对体内的特定蛋白质运用 ELISA 或 CLIA 方法快速定量检测，应用范围极为广泛。例如临床乙肝“两对半”检查、艾滋病检查、肿瘤检测等临床应用就是利用 ELISA试剂盒进行的。另外，检测试剂盒还广泛用于毒品与兴奋剂的检测，农药残留的检测，水污染检测等等。

        第五，检测试剂盒随着分子生物学与免疫学的进步快速发展。2003年的“非典”病毒在当时条件下很难确诊及治疗。分子生物学与免疫学在此后十多年间发展迅速，禽流感、猪流感、埃博拉病毒、中东呼吸综合征等新的病毒出现后仅需几天时间，科学家就可以检测出其来源和基因序列。在此基础上获取相应蛋白和抗体，研制疫苗、抗体血清的周期也大大缩短，相应的检测试剂盒开发也十分迅速。

资料来源：公开资料，中国报告网整理，转载请注明出处（ww）。